2．樣本稀釋 用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清樣本按1：100稀釋?zhuān)缛?ul樣本與495ul樣本稀釋液，混勻。陰性、陽(yáng)性對照品不用稀釋?zhuān)苯蛹訕印?/div>
3．加樣反應 每次試驗設陰性對照2孔、陽(yáng)性及空白對照各1孔(分別加入陰性、陽(yáng)性對照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應30分鐘后，甩去孔內液體，每孔注滿(mǎn)工作洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘后再甩凈，拍干。
4． 加酶反應 除空白對照孔外，每孔加酶結合物(1號液) 1滴。37℃避光反應30分鐘后，甩去孔內液體，如上洗滌，拍干。
5．顯色反應 加底物液(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴，混勻，37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴，終止反應（加終止液后，藍色會(huì )變?yōu)辄S色）并判讀結果。
【結果判斷】
陰性對照呈無(wú)色或淺黃色，陽(yáng)性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。
以空白對照調零，用酶標儀于450nm（630nm作參比波長(cháng)）讀取吸光度（A值）。待檢孔A值大于陰性對照A值平均值的2.1倍者判為陽(yáng)性。如陰性對照A值的平均值低于0.08時(shí)按0.08計算。
【注意事項】
1.試劑盒于2-8℃保存，有效期6個(gè)月。每次使用前應先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應密封保存。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗樣本應為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時(shí)，建議使用水浴箱。如無(wú)條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。