細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時(shí)根據培養細胞的類(lèi)型、所需培養體積及不同的實(shí)驗目的而定。
(1)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇
不同形狀的培養板有不同用途。培養細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀(guān)測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致。因此做MTT等實(shí)驗時(shí),無(wú)論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養板。要特別注意材質(zhì), 標示"Tissue Culture (TC) Treated"是養細胞用的。
U型或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在**學(xué)方面,當做兩種不同**細胞混合培養時(shí),需要二者相互接觸刺激,這時(shí)一般會(huì )選用U型板,因為細胞會(huì )由于重力的作用而聚集在很小的范圍內內。圓底培養板還會(huì )用于同位素摻入的實(shí)驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養,如"混合**細胞培養"等。V型板常用做細胞殺傷、**學(xué)血凝集實(shí)驗。細胞殺傷這種實(shí)驗也可用U型板替代(加入細胞后,低速離心)。
(2)Terasaki板和普通細胞培養板的區別
Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設計便于對晶體的觀(guān)察與結構分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應用產(chǎn)品的外形結構也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀(guān)察晶體結構。
細胞培養板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細胞貼壁生長(cháng)與伸展。當然還有浮游細胞的生長(cháng)材料,同時(shí)還有low binding surface
(3)細胞培養板與酶標板的區別
酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,也可以用來(lái)測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不用做細胞培養,它主要做**酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標工作液。
(4)常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過(guò)多會(huì )影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實(shí)驗的目的不同靈活掌握。
常用的培養器皿
培養器皿
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底面積(cm2)
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加培養液量(mL)
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可獲細胞量
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96孔培養板
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0.32
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0.1
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105
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24孔培養板
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2
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1.0
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5×105
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12孔培養板
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4.5
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2.0
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106
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6孔培養板
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9.6
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2.5
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2.5×106
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4孔培養板
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28
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5.0
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7×106
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3.5cm培養皿
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8
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3.0
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2.0×106
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6cm培養皿
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21
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5.0
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5.2×106
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9cm培養皿
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49
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10.0
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12.2×106
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10cm培養皿
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55
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10.0
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13.7×106
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25cm塑料培養瓶
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25
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5.0
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5×106
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75cm塑料培養瓶
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75
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15~30
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2×107
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25cm玻璃培養瓶
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19
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4.0
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3×106
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100cm玻璃培養瓶
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37.5
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10.0
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6×106
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250cm玻璃培養瓶
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78
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15.0
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2×107
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2500cm旋轉培養瓶
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700
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100~250
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2.5×108
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注:各種單層生長(cháng)的細胞在培養皿中長(cháng)滿(mǎn)的細胞數,主要取決于器皿底表面積和細胞體積的大小。上表以Hela細胞為例給出的可獲細胞量?jì)H作參考。
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