導讀：
新買(mǎi)到的細胞，實(shí)驗室傳了幾代的細胞，又或者儲存于溫冰箱幾年不用的細胞，被污染了么？ 鑒定正確么？用它做研究會(huì )影響實(shí)驗結果么？ 沒(méi)有經(jīng)過(guò)相應的細胞鑒定，使用了被污染的細胞，經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗，寫(xiě)出一篇論文，但是結論被推翻，論文被召回，大量的時(shí)間、物力和人力被浪費，一切都要從頭再來(lái)。
背景介紹
應用于生物醫學(xué)研究領(lǐng)域的哺乳動(dòng)物細胞被錯誤鑒定和交叉污染的問(wèn)題，一直是一個(gè)普遍存在的突出問(wèn)題。據統計，國外實(shí)驗室有20%左右的細胞株被錯誤鑒定和交叉污染，NIH和ATCC近兩年都對此發(fā)出呼吁，要求研究者對細胞進(jìn)行鑒定。近年來(lái)，大量研究表明STR基因分型方法是進(jìn)行細胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的*有效和準確的方法之一，STR基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。
細胞STR鑒定的必要性
在過(guò)去的45 人類(lèi)乳突狀瘤病毒（人類(lèi)**狀瘤病毒18或HPV18）轉型成癌細胞的，而且和正常**頸細胞有許多不同。 據估計，國外實(shí)驗室已建株細胞有接近20％存在上述問(wèn)題。
2008年，約瑟芬Nefkens研究所的分子生物學(xué)家Winand13株食管腺癌細胞系中，其中3株：SEG-1，BIC-1和SK-GT-5被污染，這些細胞株混合有其他癌細胞。這些細胞系已經(jīng)被多家實(shí)驗室應用在兩個(gè)臨床試驗、并發(fā)表了超過(guò)100篇SCI文章，并申請了11個(gè)美國**，這一研究結果被發(fā)布在*新一期的Journal of the National Cancer Institute（JNCI）。
2007 年 NIH發(fā)布了通知，強烈建議在使用培養細胞的時(shí)候進(jìn)行鑒定（authentication）。2008 年底，專(zhuān)家提議ATCC致力于人源細胞系的鑒定工作，并制定鑒定的標準程序。
近年來(lái)，大量研究表明 STR 基因分型方法是進(jìn)行細胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的*有效和準確的方法之一，STR基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。美國的ATCC 細胞庫、德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR 分型提供了各細胞株的數據供比對。
2011年初，美國菌種保藏中心（ATCC）制定了人源細胞系STR鑒定標準，旨在約束因細胞交叉污染和錯誤辨識所導致的無(wú)效科研數據的不斷擴增。更重要的是，細胞系的**鑒定在研發(fā)基于細胞下的醫學(xué)產(chǎn)品時(shí)起到至關(guān)重要的作用，它能避免將人體細胞暴露于錯誤鑒定細胞中的風(fēng)險。
細胞STR鑒定方法
要求能提供細胞的一般和特殊的生物學(xué)性狀指標。一般特性指標包括：細胞的一般形態(tài)、特異性結構、細胞生長(cháng)曲線(xiàn)和分裂指數、倍增時(shí)間、接種率、染色體分析、同工酶檢查、DNA指紋圖譜等。特異性指標常依據細胞種類(lèi)和功能的特異性進(jìn)行鑒定，比如，若為腺細胞則一般鑒定是否有特殊產(chǎn)物包括分泌蛋白或**產(chǎn)生；若為腫瘤細胞，還應能夠證明細胞確系來(lái)源于腫瘤組織而非其它，并仍保留有腫瘤組織的特性，為此常需做集落形成實(shí)驗、裸鼠致瘤實(shí)驗以及對正常組織的侵襲實(shí)驗等。
一、對正常細胞系的鑒定
對正常細胞系的鑒定主要圍繞以下四個(gè)方面進(jìn)行：（1）鑒定細胞的種系來(lái)源：常用方法主要有染色體分析、同工酶分析、DNA指紋圖譜等技術(shù)。（2）鑒定細胞的組織來(lái)源：可通過(guò)形態(tài)學(xué)手段、檢測組織特異性抗原等進(jìn)行鑒定。（3）細胞是否發(fā)生轉化和惡變：主要通過(guò)核型分析、細胞生長(cháng)行為觀(guān)察（是否喪失接觸抑制）、裸鼠成瘤實(shí)驗等進(jìn)行鑒定。（4）細胞有無(wú)發(fā)生交叉污染，主要通過(guò)同工酶及DNA指紋圖譜技術(shù)進(jìn)行鑒定。
二、對腫瘤細胞系的鑒定
對腫瘤細胞系的鑒定主要圍繞其惡型性展開(kāi)，染色體的異常、接觸抑制和密度依賴(lài)生長(cháng)特性的改變、集落形成能力、裸鼠成瘤、動(dòng)物體內的侵襲生長(cháng)，以及某些基因、分子水平的特征均是腫瘤細胞鑒定的方向。
細胞STR鑒定的意義
由于細胞培養體系在生物**的研究和技術(shù)發(fā)展中非常重要，適當的細胞系鑒定過(guò)程即成為每個(gè)研究人員的*大興趣點(diǎn)。然而，交叉污染的問(wèn)題仍然存在。隨著(zhù)世界范圍內實(shí)驗室使用新細胞系的數量增多和頻率增加，在質(zhì)量控制(如：細胞系鑒定)的基本原則上產(chǎn)生了巨大的差別。從已經(jīng)發(fā)表的、使用"錯誤"的細胞系而導致可疑性結果的研究論文，到用于臨床的干細胞系和其它細胞系，交叉污染影響到了科學(xué)研究的每個(gè)領(lǐng)域-從實(shí)驗臺到臨床。如果在細胞培養的處理和操作中不進(jìn)行重大變革，那么交叉污染將會(huì )成為一個(gè)更大、更嚴重的問(wèn)題。
細胞培養體系在生物研究和**研究發(fā)展中非常重要，隨著(zhù)研究的深入，細胞系的種類(lèi)也逐漸增多，而細胞系的交叉污染仍然存在。交叉污染給實(shí)驗研究帶來(lái)了很?chē)乐氐膯?wèn)題，如果使用了錯誤的細胞系使研究的結果遭到質(zhì)疑，前期的實(shí)驗可能都要重新來(lái)做。因此對細胞系的認證是有必要的。
來(lái)源：生物探索
