細胞處理方法
一、 貼壁細胞
1. 接收到細胞,肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色,顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況,并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照(建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細胞100X,200X各一張)。
2. 用75%的酒精**(建議配置75%的酒精的水是**過(guò)的)。
3. 嚴格無(wú)菌操作,打開(kāi)細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.25%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7. 換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
二、 懸浮細胞
1. 接收到細胞,肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色,顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況,并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照(建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細胞100X,200X各一張)。
2. 用75%的酒精**(建議配置75%的酒精的水是**過(guò)的)。
3. 嚴格無(wú)菌操作,打開(kāi)細胞培養瓶。
4. 細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。
6. 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2培養。